La Unitat de Citometria (UC) del Servei de Cultius Cel·lulars, Producció d'Anticossos i Citometria ofereix la citometria de flux com a unaeina única per a la recerca en l'àmbit de la biologia cel.lular i molecular.
Les tècniques citomètriques permetenl'anàlisi de diferents paràmetres moleculars, bioquímics igenèticsen suspensions de cèl.lules o partícules biològiques que han estat marcades amb susbstàncies fluorescents o tenen autofluorescència. També permet analitzar partícules o cèl.lules en funció de la seva la mida i la seva complexitat.
Els avantatges de la citometria en frontd'altres mètodes són l'objectivitat, l'alta sensibilitat,la velocitat d'anàlisi i la possibilitat de realitzar mesures de diferents característiques de forma simultània sobre cèl.lules individualitzades dintre d'una població heterogènia.
La UC està a disposició dels investigadors de la UAB, així com de les entitats públiqueso privadesalienes a la UAB que ho sol.licitin.
Àrees generals d'aplicació
Detecció multiparamètrica d'antígens de superficie, citoplasmàtics i nuclears
Detecció i cuantificació de proteïnes solubles o intracel.lulars mitjançant assajos multiplex (BD Cytometric Bead Array)
Detecció de citocines per tinció intracel.lular i mitjançant Multiplex Bead Array System
Mesures del contingut de DNA
Variacions de ploidia
Estudi del cicle cel.lular
Mesures del contingut de DNA
Mesura de la proliferació
Incorporació de BrdU
Dilució de CFSE
Viabilitat cel.lulari apoptosi
Annexin/IP
TUNEL
Mètode Sub-G1
Estat funcional de la cèl.lula
Activació: potencial de membrana, pH i Ca++ intracel.lular
Producció de radicals lliures
Fagocitosi
Eficiència de trasnfecció (p. ex GFP)
Detecció i recompte de poblacions de microorganismes (cultius bacterians, planckton...)
Serveis
Servei tècnic per l'adquisició i l'anàlisi de mostres
Assessorament tècnic als usuaris
Entrenament de nous usuaris en la utilització del citòmetre
Ajuda en el disseny de protocols
Desenvolupament de noves aplicacions
Equipament
Citòmetre FACSCanto (BDBiosciences)
Citòmetre de flux analitzador, equipat amb un làser d'argó (emisió a 488 nm) i un de diode vermell (emisió a 635 nm). Permet treballar amb 8 paràmetres (FCS, SSC i6fluorescències) com a configuració òptica estàndard. Electrònica digital d'alta velocitat.
Hardware: HP Xw 4100 amb monitor plade 18" Software: BD FACSDiva 4.0. Sistema operatiu Microsoft Windows XP Pro
Citòmetre FACSCalibur (Becton Dickinson)
Citòmetre de flux analitzador, equipat amb un làser d'argó (emisió a 488 nm) i un de diode vermell (emisió a635 nm). Permet treballar amb 6 paràmetres (FCS, SSC i 4 fluorescències) com a configuració òptica estàndard.
Hardware: Macintosh G4 amb monitor pla de 18".Sistema operatiu MacOS 9.2 i MacOS X Software: CellQuestPro, Paint-a-Gate, ModFit LT, Attractors i Microsoft Office 2001
Separador cel.lular Automacs (Miltenyi Biotec)
Separador immunomagnètic. L´equip autoMACS permet la separació automatitzada de cèl.lulesmitjançant boles magnètiques adherides a la superfície cel.lular amb anticossos monoclonals. La seva capacitat permet separar desde 105 fins a 4x109 cèl.lules totals en 5 minuts i realitzar diferents processos de separació seqüencialment, amb un enriquiment de la subpoblació inicial de fins a 10.000vegades.
La Unitat de Citometria (UC) del Servei de Cultius Cel·lulars, Producció d'Anticossos i Citometria ofereix la citometria de flux com a una
